Rossa (Sheila Marcia) dimarahi oleh ibunya, Diah (Rina Hasyim), karena adik Rossa, Emily (Stefanie Hariadi Theresia), hilang tanpa kabar. Rossa menceritakan semua kejadian itu kepada sahabatnya, Tari (Nadila Ernesta), yang kemudian merasa curiga bahwa Emily dibawa pergi oleh kereta hantu. Meskipun ia tidak percaya tentang kereta hantu itu, Rossa mengikuti ajakan Tari untuk menemui Bobby (Melvin Giovanie), yang menjalankan situs investigasi "Dunia Gaib" bersama dengan Doddy (Fendi Trihartanto) dan Peggy (Gianina Emanuela).
Sesampainya di tempat Bobby, Rossa merasa Bobby telah melakukan hal konyol dengan mengikuti ajakan Tari dan kemudian begegas pulang. Di dalam taksi, Rossa mengingat kilas balik ketika ia dan Emily bertengkar hebat hingga Rossa mengusir adiknya dari rumah. Hubungan Rossa dengan adiknya tidak berjalan baik karena ia merasa ibunya lebih memperhatikan adiknya. Ketika sampai di rumah, Rossa mulai mendapati penampakan aneh seorang hantu perempuan.
Bobby menjelaskan asal-usul kereta hantu, lalu ia mengajak Doddy dan Peggy untuk menaiki kereta hantu tersebut dibantu oleh Ki Anom (Abio Abie), seorang paranormal. Doddy dan Peggy ragu, tetapi Bobby membujuk mereka dengan memberitahu bahwa pengalaman ini akan berguna untuk situs mereka. Di tempat lain, Rossa kembali mengalami mimpi buruk diteror oleh hantu perempuan dan ketika ia bangun, ia menyadari bahwa ia sedang berada di sebuah kafe dan segera bertemu dengan Tari. Tari bertemu dengan Rossa dan bilang bahwa ia akan ikut naik kereta hantu bersama Bobby. Tari mengajak Rossa, tetapi Rossa ragu-ragu dan tidak percaya sehingga ia menolak ajakan Tari.
Bobby, Doddy, Peggy dan Tari tiba di stasiun kereta Manggarai. Mereka melakukan ritual memanggil kereta hantu bersama Ki Anom. Setelah kereta muncul, mereka naik ke kereta hantu tersebut. Berbagai peristiwa mengerikan terjadi selama mereka di atas kereta hantu. Akhirnya, mereka selamat berkat pertolongan Ki Anom. Setelah mereka kembali, banyak kejadian aneh bermunculan. Ketika Doddy mencuci film, ia diganggu oleh hantu perempuan, sementara Tari diganggu saat ia sedang mandi. Doddy yang panik segera berlari menemui Bobby dan bercerita mengenai kejadian-kejadian aneh tersebut. Bobby hanya menganggap Doddy terlalu stres sehingga ia meminta Doddy menenangkan diri. Keesokan harinya dalam perjalanan bersama Peggy mengendarai motor, Doddy diganggu oleh hantu perempuan yang berpura-pura menjadi Peggy. Doddy yang ketakutan dan panik mengendarai motornya ketika melihat sosok hantu perempuan itu hingga akhirnya Doddy meninggal ditabrak mobil.
Tari dan Rossa kembali berkunjung ke tempat Bobby dan menemukan Peggy yang sedang menyalahkan Bobby atas kematian Doddy. Peggy bergegas keluar rumah dan Tari mengejarnya. Bobby memberitahu Rossa bahwa ia terobsesi dengan kereta hantu karena ia merasa kekasihnya yang hilang diambil oleh kereta tersebut. Rossa pun meminta Bobby untuk mempertemukannya dengan Ki Anom. Ketika mereka bertemu dengan Ki Anom, Ki Anom memberitahukan bahwa keadaan Emily setengah mati dan stengah hidup (koma) dan lokasinya ada di sebuah desa terpencil. Seiring perjalanan pulang, Bobby memberikan informasi bahwa hantu perempuan yang mengganggu mereka terus-menerus adalah arwah perempuan penganut aliran sesat yang ikut meninggal ketika kecelakaan kereta api jatuh ke jurang. Mobil Bobby tiba-tiba berhenti di atas rel kereta api, lalu kereta api segera datang seolah-olah akan melindas mobil mereka. Rossa dan Bobby panik dan berteriak, tetapi kereta api itu hilang begitu saja.
Rossa ditelepon oleh seseorang dari desa terpencil dan diberitahu bahwa Emily ditemukan. Rossa kemudian memberitahukan Bobby dan bergegas berangkat ke alamat tersebut. Ketika tiba di desa terpencil, Emily ditemukan dalam keadaan tidak sadar. Warga setempat menjelaskan bahwa Emily ditemukan di atas rel kereta api. Bobby menyarankan untuk membawa Emily ke rumah sakit. Tiba-tiba, telepon genggam Bobby berbunyi, lalu Bobby mendapatkan kabar bahwa Peggy telah meninggal. Emily kemudian sadar sehingga Rossa dan Bobby langsung mengajak Emily pulang. Sebelum mereka bertiga meninggalkan desa, seorang warga memberitahu bahwa Emily masih dikuasai roh jahat dan memberikan jimat ke Rossa. Sepanjang perjalanan pulang, Emily tiba-tiba berontak dan berteriak karena melihat Rossa berwujud seperti hantu. Karena panik, Bobby menghentikan mobil, lalu Emily langsung keluar dari mobil dan berlari ke arah stasiun kereta.
Ki Anom menghubungi Bobby dan memperingatkan bahwa hantu perempuan itu mengejar orang yang selamat dari kereta hantu. Mereka pun berusaha mencari-cari Emily sampai akhirnya Rossa menemukannya. Ketika Bobby mencoba menghampiri Rossa dan Emily, Bobby diserang oleh hantu perempuan itu dan dibunuh dengan baling-baling kipas plafon yang merobek lehernya. Rossa dan Emily berlari hingga di rel kereta, tetapi kereta api tiba-tiba muncul dan akan melindas mereka, Rossa ingat tentang jimat yang diberikan dan memberikannya kepada Emily. Kereta hantu melindas mereka, Emily selamat, tetapi Rossa diambil.
Emily pulang ke rumahnya dan ia terkejut karena mengetahui dirinya masih diteror oleh hantu perempuan itu. Sementara di kampus, Tari membaca artikel koran tentang Rossa yang hilang, lalu ia kemudian membuka lokernya dan mengenang foto-foto bersama Rossa. Ketika Tari menutup loker, muncul penampakan arwah Rossa seolah-olah meminta pertolongan kepada Tari.