Isothiocyanate de fluorescéine

Isothiocyanate de fluorescéine
Identification
Nom UICPA	3',6'-dihydroxy-5(ou 6)-isothiocyanatospiro[isobenzofuranne-1(3H),9'-[9H]xanthène]-3-one
Synonymes	Fluorescéine-5-isothiocyanate, FITC
N^o CAS	27072-45-3
N^o ECHA	100.043.810
N^o CE	248-207-7
PubChem	18730
SMILES	C1=CC2=C(C=C1N=C=S)C(=O)OC23C4=C(C=C(C=C4)O)OC5=C3C=CC(=C5)O PubChem, vue 3D
InChI	InChI : vue 3D InChI=1S/C24H16Cl2O7/c1-11(27)31-21-9-19-15(7-17(21)25)23(13-5-3-4-6-14(13)24(29)30)16-8-18(26)22(32-12(2)28)10-20(16)33-19h3-10,23H,1-2H3,(H,29,30)
Propriétés chimiques
Formule	C21H11NO5S  [Isomères]
Masse molaire[1]	389,381 ± 0,024 g/mol C 64,78 %, H 2,85 %, N 3,6 %, O 20,54 %, S 8,24 %,
Propriétés physiques
T° fusion	359,5 °C
Propriétés optiques
Fluorescence	λexcitation 495 nm; λémission 521 nm
Unités du SI et CNTP, sauf indication contraire.
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L'isothiocyanate de fluorescéine ou FITC est un dérivé de la fluorescéine, utilisé dans un large spectre d'applications comme la cytométrie en flux. Le FITC est une molécule de fluorescéine fonctionnalisée avec un groupe réactif isothiocyanate (-N=C=S), remplaçant un atome d'hydrogène sur le cycle le plus bas de la structure. Ce dérivé réagit avec les nucléophiles comme les groupes amines et sulfhydryles des protéines.

Un groupe fonctionnel succinimidyle-ester greffé au noyau fluorescéine, créant le NHS-fluorescéine, forme un autre dérivé commun réagissant avec les amines, possédant une plus grande spécificité envers les amines primaires en présence d'autres nucléophiles.

Le FITC possède un pic d'excitation et d'émission à 495 nm et 521 nm respectivement. Comme la plupart des fluorochromes, il est sujet au photobleaching. Par conséquent, des dérivés de la fluorescéine tels que l'Alexa 488 et le DyLight 488 ont été optimisés pour des applications chimiques et biologiques nécessitant une plus grande photostabilité, une plus grande intensité de fluorescence ou l'ajout de groupements différents.

Notes et références

1. Masse molaire calculée d’après « Atomic weights of the elements 2007 », sur www.chem.qmul.ac.uk.