Народилася 11 лютого 1969 в родині американського актора грецького походження Джона Еністона (англ.John Anthony Aniston, справжнє ім'я Янніс Анітіос Анастасакіс, грец.Γιάννης Ανήτιος ΑναστασάκηςМФА: [ˌænəstəˈsækɪs], нар. 24.07.1933 на Криті) та акторки Ненсі Доу (англ.Nancy Maryanne Dow, 22.07.1936—25.05.2016). Прізвище батька можна побачити на весільній табличці у фінальних кадрах сьомого сезону серіалу «Друзі» (в написанні Anastassakis).[4] Дід по матері, Ґордон МакЛін Доу, мав шотландсько-англійське походження, а бабуся, Луїза Ґріеко — італійське. Хрещеним батьком Дженіфер став греко-американський актор, найкращий друг батька — Теллі Савалас.
Виросла у Нью-Йорку з двома звідними братами: Джоном Меліком (англ.John Melick, старший брат по матері) та Алексом Еністоном (англ.Alex Aniston, молодший по батьку). Частину дитинства провела в Греції, більше — в Нью-Йорку, де батько знімався у мильних операх. У 1985 році родина переїхала в Лос-Анджелес.
Закінчила мангетенську Школу Фіорелло Ла Гардіа — середню школу музичного, образотворчого та театрального мистецтва (англ.Fiorello H. LaGuardia High School of Music & Art and Performing Arts). Бажання стати акторкою зросло, коли брала участь у бродвейських постановках «З усіх сил» та «Танцюючи на могилі шахової дошки». Одночасно підробляла на тимчасових роботах, кур'єркою та телемаркетологинею.
Еністон зустрічалася з музикантом Адамом Дьюріцем і актором Тейтом Донованом. Її шлюб з Бредом Піттом (одружилася 29 липня 2000, розійшлася 7 січня 2005, офіційно розлучилася 2 жовтня) часто висвітлювала преса. ЗМІ називали причинами розриву роман Пітта з Анджеліною Джолі і заяви Пітта про небажання Еністон мати з ним дітей, що Еністон заперечувала. Відновитися їй допомогли заняття йогою. Після розлучення зустрічалась з актором Вінсом Воном. Потім з Джоном Мейером, разом відвідали церемонію вручення Оскара 2009, в тому ж році розлучилися. На зйомках комедії «Мисливець за головами» завела стосунки з актором Джерардом Батлером. З 2011 року зустрічається з актором Джастіном Теру. 5 серпня 2015 одружилася. У лютому 2018 стало відомо про розрив[5]. У жовтні 2019 року Еністон зверталася до спеціального агентства пошуків особистого щастя: за $750 тис. їй організували побачення з бізнесменом, але стосунки не мали продовження.[6] На початку листопада 2019 року стало відомо про стосунки з режисером Віллом Спеком, з яким познайомилася 2016 року на зйомках «Новорічного корпоратива».[6]
Еністон брала участь у радіошоу Говарда Стерна наприкінці 1980-х — початку 1990-х. Вона переїхала в Голлівуд і в 1990 році виконала першу телевізійну роль у серіалі «Molloy», а також роль у телефільмі «Табір Кукамонга». Крім того, працювала в серіалах «Ferris Bueller» (1990), «The Edge» (1992) і «Muddling Through» (1994), а також з'являлася як запрошена акторка в телесеріалах «Квантовий стрибок», «Голова Германа» і «Закон Берка». Після низки скасованих серіалів, а також роботи в розкритикованому фільмі жахів «Лепрекон», Еністон серйозно замислювалася про завершення кар'єри акторки.
Однак змінила плани, прийшовши на кастинг серіалу «Друзі», який стартував на NBC в 1994 році. Продюсери шоу спочатку хотіли взяти на роль Рейчел Ґрін акторку Кортні Кокс, але Кокс сказала, що бачить себе в ролі Моніки Геллер. Після появи Еністон на знімальному майданчику всім стало зрозуміло, що вона ідеально втілить Рейчел Ґрін. Цю персонажку вона грала протягом усього серіалу з 1994 по 2004 роки. Серіал став дуже успішним, і Еністон, поряд з іншими провідними акторами, здобула популярність у телеавдиторії. Її зачіску копіювали жінки всього світу. В останніх трьох сезонах «Друзів» Еністон отримувала платню в один мільйон доларів за серію. За роботу у шоу була п'ятиразовою номінанткою «Еммі» (і одноразовою лауреаткою) в номінації «Найкраща жіноча роль у комедійному серіалі».
Еністон знімалася в кількох фільмах-виставах, включаючи культовий хіт «Офісний простір». Вона отримала дуже гарні відгуки критики за роль у фільмі «Хороша дівчинка» (2002). Наприкінці 2005 року виконала головні ролі у фільмах «Ціна зради» і «Ходять чутки», які мали непогані касові збори, принісши понад 30 мільйонів доларів кожен.
В 2006 затверджена на кілька великих ролей, включаючи романтичну комедію «Розлучення по-американськи». В кінці року спродюсувала фільм «Дружина сенатора», в якому також зіграла Розалін.
Найуспішнішим фільмом Еністон є «Брюс всемогутній», що вийшов у 2003 році (касові збори 243 мільйони доларів у США), у якому вона втілила подругу головного героя. Також досить успішний був фільм «А ось і Поллі».
У 2016 роціжурнал People віддав перемогу Дженніфер Еністон у щорічній номінації «Найкрасивіша жінка світу».[8]