Lee Jun-ho nasce a Ilsan, Corea del Sud, il 25 gennaio 1990. Inizia ad attirare l'attenzione del pubblico vincendo nel 2006 il reality showSuperstar Survival, grazie al quale firma un contratto con la casa discografica JYP Entertainment, produttrice dello show. Nel 2008 partecipa al programma di MnetHot Blood Men, che segue il percorso di tredici ragazzi tirocinanti della band One Day; gli One Day vengono poi divisi in due gruppi distinti, i 2AM e i 2PM. Lee Jun-ho debutta in quest'ultimo gruppo sei mesi dopo, il 4 settembre 2008, insieme ad altri sei membri con il singolo10 Out of 10 estratto dal primo EP Hottest Time of the Day. È solo con il secondo EP 2:00PM Time for Change, uscito il 16 aprile 2009, che il gruppo assurge alla fama.
A partire dal 2011 Lee Jun-ho inizia a dedicarsi attivamente alla composizione musicale scrivendo Give It to Me per l'album Hands Up, utilizzato nella colonna sonora del film Blind, e Move On. Nel 2012, per il programma Music and Lyrics, collabora con l'attrice Kim So-eun per la canzone Sad Love, che lui compone e lei scrive, duetta con Vanness Wu nel brano Undefeated per la colonna sonora della serie taiwanese Ai shang qiaokeli, e compone e scrive Forever, parte del singolo giapponese dei 2PM Masquerade. Nel 2013 partecipa all'EP di debutto di Wooyoung intitolato 23, Male, Single componendo Be With You.
A maggio 2013 la JYP Entertainment annuncia il suo debutto da solista in Giappone, che avviene il 24 luglio 2013 con l'uscita dell'EP Kimi no koe. Il 9 luglio 2014 ne pubblica un secondo, FEEL. Per quest'ultimo, che raggiunge il primo posto nella classifica giornaliera degli album Oricon il giorno dell'uscita, scrive, compone e produce tutte le tracce. Il 15 luglio 2015 pubblica un terzo EP in Giappone dal titolo SO GOOD, che raggiunge la prima posizione nella classifica Oricon il giorno dell'uscita.[3] Il 14 settembre esce in Corea il suo primo album, One, una raccolta delle versioni in coreano dei brani da lui composti e originariamente cantati in giapponese.[4]
Lee debutta sul grande schermo con un ruolo secondario nel 2013 nel film Cold Eyes;[5] recita poi nel film Hyeomnyeo - Kar-ui gi-eok al fianco di Lee Byung-hun[6][7] e ottiene il primo ruolo importante nel film Seomul, che arriva nei cinema sudcoreani nel 2015.[8] Segue nel 2016 il debutto televisivo.