3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin

Strukturformel
Strukturformel von 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin
Allgemeines
Name 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin
Andere Namen

TMB

Summenformel C16H20N2
Kurzbeschreibung

weiße, schwach riechende Kristalle[1]

Externe Identifikatoren/Datenbanken
CAS-Nummer 54827-17-7
EG-Nummer 259-364-6
ECHA-InfoCard 100.053.949
PubChem 41206
ChemSpider 37605
Wikidata Q2259258
Eigenschaften
Molare Masse 240,34 g·mol−1
Aggregatzustand

fest[1]

Dichte

0,45 g·cm−3 (Schüttdichte)[1]

Schmelzpunkt

168–171 °C[1]

Löslichkeit

praktisch unlöslich in Wasser[2]

Sicherheitshinweise
GHS-Gefahrstoffkennzeichnung[1]
Gefahrensymbol

Achtung

H- und P-Sätze H: 315​‐​319​‐​335
P: 261​‐​305+351+338[1]
Soweit möglich und gebräuchlich, werden SI-Einheiten verwendet.
Wenn nicht anders vermerkt, gelten die angegebenen Daten bei Standardbedingungen (0 °C, 1000 hPa).

3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin (TMB) ist eine chemische Verbindung aus der Klasse der Benzidine und wird als Chromogen in der Immunhistochemie verwendet.

Eigenschaften

Nach der Aktivierung durch Peroxidase ist TMB blau bei einem Absorptionsmaximum bei 370 nm.[3] Wenn Schwefelsäure hinzugegeben wird, färbt sich TMB gelb mit einem Absorptionsmaximum bei 450 nm.[4]

Oxidation von 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin (TMB)
Oxidation von 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin (TMB)

TMB ist lichtempfindlich.

Verwendung

TMB wird in der Biochemie auf Grund seiner Farbeigenschaften im Zuge einer Immunfärbung, z. B. beim ELISA verwendet. Zusammen mit Wasserstoffperoxid und einem Phosphat-Citrat-Puffer wird TMB als Reaktionsstarter verwendet. Mit der Fixierlösung (Schwefelsäure) wird der Farbwechsel herbeigeführt, nachdem sich die Proben dank TMB blau verfärbt haben. Ist die Reaktion gestoppt, wertet man den ELISA mit einem ELISA-Reader (Photometer) aus.

Einzelnachweise

  1. ↑ a b c d e f Datenblatt 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine, ≥99% bei Sigma-Aldrich, abgerufen am 12. Juni 2013 (PDF).
  2. ↑ Eintrag zu 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin in der GESTIS-Stoffdatenbank des IFA, abgerufen am 12. November 2022. (JavaScript erforderlich)
  3. ↑ Pasquale Palladino, Francesca Torrini, Simona Scarano, Maria Minunni: 3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine as multi-colorimetric indicator of chlorine in water in line with health guideline values. Hrsg.: Analytical and Bioanalytical Chemistry. Springer Nature, 1. September 2020, S. 7861–7869, doi:10.1007/s00216-020-02918-9.
  4. ↑ T. L. Martin, E. J. Mufson, M. M. Mesulam: The light side of horseradish peroxidase histochemistry. In: J. Histochem. Cytochem. Band 32, Nr. 7, 1984, S. 793, PMID 6736628.