Phosphat-Citrat-Puffer

Der Phosphat-Citrat-Puffer (synonym McIlvaine-Puffer) ist ein in der Biochemie verwendeter Puffer, der unter anderem aus Phosphat und Citrat besteht.

Eigenschaften

Der Phosphat-Citrat-Puffer wird aus zwei wässrigen Stammlösungen A (basisch, 0,2 M Dinatriumphosphat) und B (sauer, 0,1 M Citronensäure) erzeugt. Durch Veränderung der Anteile der beiden Stammlösungen können im Phosphat-Citrat-Puffer pH-Werte von 2,2 bis 8 eingestellt werden.

Er wird unter anderem in der Färbelösung für die Meerrettichperoxidase im Zuge einer Immunfärbung verwendet, z. B. im ELISA. In einer 1:1-Mischung mit Glycerol wird er zudem als Eindeckmedium in der Mikroskopie verwendet. Daneben wird er in der Mikroskopie auch zum Waschen und Färben der Präparate verwendet.[1] Für einen RNase-Verdau wird der Phosphat-Citrat-Puffer mit einem pH-Wert zwischen 3,8 und 4 verwendet.[2] Der Phosphat-Citrat-Puffer wurde 1921 von Theodore Clinton McIlvaine veröffentlicht.[3]

Mischungstabelle für 20 mL McIlvaine-Puffer[3]
pH 0,2 M Na2HPO4 (mL) 0,1 M Citronensäure (mL)
2,2 00,40 19,60
2,4 01,24 18,76
2,6 02,18 17,82
2,8 03,17 16,83
3,0 04,11 15,89
3,2 04,94 15,06
3,4 05,70 14,30
3,6 06,44 13,56
3,8 07,10 12,90
4,0 07,71 12,29
4,2 08,28 11,72
4,4 08,82 11,18
4,6 09,35 10,65
4,8 09,86 10,14
5,0 10,30 09,70
5,2 10,72 09,28
5,4 11,15 08,85
5,6 11,60 08,40
5,8 12,09 07,91
6,0 12,63 07,37
6,2 13,22 06,78
6,4 13,85 06,15
6,6 14,55 05,45
6,8 15,45 04,55
7,0 16,47 03,53
7,2 17,39 02,61
7,4 18,17 01,83
7,6 18,73 01,27
7,8 19,15 00,85
8,0 19,45 00,55

Einzelnachweise

  1. ↑ Arun Kumar Sharma: Chromosome Techniques. Butterworth-Heinemann, 2014, ISBN 978-1-4831-0084-5.
  2. ↑ Karl Maramorosch: Methods in Virology. Academic Press, 2014, ISBN 978-1-4832-6226-0, S. 508.
  3. ↑ a b T. C. McIlvaine: A buffer solution for colorimetric comparison. In: J. Biol. Chem. 49. Jahrgang, Nr. 1, 1921, S. 183–186 (jbc.org [PDF]).