Lapisan trombosit dan leukosit ("lapisan bungalan") antara eritrosit dan plasma darah setelah sentrifugasi lembut seluruh darah dengan antikoagulan natrium etilendiamintetraasetat.
Setelah sentrifugasi, lapisan cairan bening ( plasma ) dapat dibedakan, lapisan cairan merah yang mengandung eritrosit, dan lapisan tipis di antaranya. Berisi kurang dari 1% total volume sampel darah, lapisan bungalan (disebut demikian karena biasanya berwarna bungalan ), mengandung sebagian besar leukosit dan trombosit . [2][3] Lapisan bungalan biasanya berwarna keputihan, tetapi terkadang berwarna hijau jika sampel darah mengandung sejumlah besar neutrofil, yang kaya akan mieloperoksidase berwarna hijau.
Darah manusia setelah pemisahan dengan sentrifugasi. Plasma (lapisan atas), lapisan bungalan (tengah, lapisan berwarna putih) dan lapisan eritrosit (sel darah merah) (bawah) dapat dilihat.
Lapisan bungalan biasanya digunakan untuk ekstraksi DNA, [4] dengan leukosit menyediakan sumber sel berinti yang kira-kira 10 kali lebih terkonsentrasi. [5] Lapisan ini diekstraksi dari darah mamalia karena eritrosit mamalia tidak berinti dan tidak mengandung DNA. Protokol yang umum adalah menyimpan spesimen lapisan bungalan untuk isolasi DNA di masa depan dan spesimen ini mungkin tetap berada dalam penyimpanan beku selama bertahun-tahun. [6]
Kegunaan diagnostik
Lapisan bungalan kuantitatif (QBC), berdasarkan stratifikasi sentrifugal komponen darah, merupakan uji laboratorium untuk mendeteksi parasit malaria, serta parasit darah lainnya. [7]
Darah diambil dalam tabung kapiler QBC yang dilapisi dengan jingga akridin (pewarna fluoresen) dan disentrifugasi; eritrosit parasit yang berfluoresensi terkonsentrasi dalam suatu lapisan yang kemudian dapat diamati dengan mikroskop fluoresensi, [8] di bawah radiasi ultraviolet pada antarmuka antara eritrosit dan lapisan bungalan. Tes ini lebih sensitif dibandingkan tes sediaan apus tebal konvensional dan pada lebih dari 90% kasus, spesies parasit juga dapat diidentifikasi. [9][10]
Dalam kasus jumlah leukosit yang sangat rendah, mungkin sulit untuk melakukan diferensial manual dari berbagai jenisnya dan hampir tidak mungkin untuk mendapatkan diferensial otomatis. Dalam kasus seperti ini, teknolog medis dapat memperoleh lapisan bungalan yang dapat digunakan untuk membuat apusan darah. Apusan ini mengandung jumlah leukosit yang jauh lebih tinggi dibandingkan darah utuh. [11]
_layer.png)
