Kiri: Plasmid pGLO dibawah cahaya normal
Kanan: Plasmid pGLO divisualisasi dibawah sinar UV
Plasmid pGLO merupakan plasmid modifikasi yang telah disisipkan gen GFP yang berasal dari ubur-ubur Aequorea victoria.[1] Plasmid ini memiliki ukuran 5400 pasangan basa dan membawa informasi titik ori (awal replikasi), gen GFP, regulator araC, dan gen resistensi terhadap antibiotika ampicillin.[2]
Mekanisme kerja
Gen GFP mengode protein berpendar hijau yang dapat berpendar jika diekspresikan oleh prokariota seperti E. coli atau eukariota seperti Caenorhabditis elegans.[1] Regulator AraC merupakan pengatur ekspresi dari gen GFP.[1] Hal ini menyebabkan operon ini baru aktif mengekpresikan protein bila ada kehadiran L-arabinosa.[1] Arabinosa akan membantu RNA polimerase berikatan dengan promotor sehingga transkripsi gen terjadi.[1] Jika sel bakteri menghasilkan protein GFP dalam jumlah yang banyak maka pendaran hijau terang di sinar UV juga akan menjadi semakin terang.[3] Selain gen itu pGLO juga mempunyai gen lain yaitu bla yang mengode enzim beta-laktamase yang menghasilkan resistensi terhadap ampicillin pada E.coli sehingga dapat digunakan sebagai penanda selektif.[3]
Referensi